荧光光度法是一种高效、灵敏的检测技术，广泛应用于水中石油类物质的检测。该方法在水样测定体积为500 ml、萃取液体积为25 ml、使用1 cm比色皿时，方法检出限为0.005 mg/L，测定下限为0.020 mg/L。此方法适用于地表水、地下水以及海水中的石油类物质分析，尤其适用于被石油污染的地表水的检测。
一、荧光法检测水中石油类物质的原理
在辫贬≤2的条件下，用正己烷萃取水样中的油类物质。经无水硫酸钠脱水后，再用硅酸镁吸附除去动植物油类等极性物质。石油类物质在激发光源照射下，分子吸收能量发生跃迁，从激发态返回到基态的振动能级时，以荧光形式释放吸收的能量，发出分子荧光。荧光强度在一定浓度范围内与石油类含量成正比。
二、检测所用试剂
盐酸：1.19 g/ml。
正己烷：色谱纯。
无水乙醇。
无水硫酸钠：于550℃下灼烧4小时，冷却后装入磨口玻璃瓶中，置于干燥器内贮存。
硅酸镁（60目-100目）：于550℃下灼烧4小时，冷却后称取适量硅酸镁于磨口玻璃瓶中，按6%（尘/尘）的比例加入实验室一级纯水，密塞并充分振荡数分钟，放置12小时，备用。
石油类标准贮备液：1000 mg/L，或直接购买市售正己烷体系适用于荧光分光光度法测定的有证标准物质。
石油类标准使用液：100 mg/L。吸取10.00 ml石油类标准贮备液于100 ml容量瓶中，用正己烷定容，摇匀，临用现配。
玻璃棉：用正己烷浸洗并晾干，置于干燥玻璃瓶中，备用。
硅酸镁吸附柱：将内径10 mm、长约200 mm的玻璃层析柱出口处填塞少量玻璃棉，再将硅酸镁缓缓倒入玻璃层析柱中，边倒边轻轻敲打，填充高度约为80 mm。
叁、检测所用仪器
采样瓶：500 ml棕色硬质玻璃瓶。
荧光分光光度计：激发波长250-700 nm；发射波长250-700 nm。
比色皿：1 cm石英荧光比色皿。
分液漏斗：1000 ml，聚四氟乙烯旋塞。
锥形瓶：50 ml，具塞磨口。
水平振荡器。
离心机：配备玻璃离心管。
一般实验室常用器皿和设备。
四、水样制备步骤
萃取
将水样全部转移至1000 ml分液漏斗中，量取25.0 ml正己烷洗涤水样瓶后，全部转移至分液漏斗中。
充分振摇2分钟，期间经常开启旋塞排气，静置分层后，将下层水相全部转移至1000 ml量筒中，测量水样体积并记录。
脱水
将萃取后的水样转移至已加入3 g无水硫酸钠的锥形瓶中，盖紧瓶塞，振摇数次，静置。
若无水硫酸钠全部结块，需补加无水硫酸钠直至不再结块。
吸附
继续向萃取水样中加入3 g硅酸镁，置于水平振荡器上，振荡20分钟，静置沉淀。
在玻璃漏斗底部垫上少量玻璃棉，过滤，待测。
五、检测具体步骤
1. 建立标准曲线
准确移取0.00 ml、0.10 ml、0.50 ml、1.00 ml、5.00 ml和10.00 ml石油类标准使用液于6个50 ml容量瓶中，用正己烷稀释至标线，摇匀。
标准系列浓度分别为0.00 mg/L、0.20 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L、10.0 mg/L和20.0 mg/L。
在激发波长为310 nm，发射波长为360 nm条件下，使用1 cm石英荧光比色皿，以正己烷作参比，测量荧光强度。
以石油类浓度（尘驳/尝）为横坐标，以荧光强度为纵坐标，建立标准曲线。
2. 检测水样
按照建立标准曲线的相同步骤，对已经萃取制备好的水质样品进行测定。
空白试样的测定按照同样步骤进行。
最后，水样中石油类的质量浓度可以按照相应的公式进行计算得出。
六、结论
荧光光度法检测水中石油类物质具有高灵敏度、高选择性和操作简便的特点，适用于多种水体的石油类物质分析。通过严格遵循上述步骤，可以确保检测结果的准确性和可靠性，为水质监测和环境保护提供有力支持。
本文标题：荧光光度法检测水中石油类物质的方法与应用
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